Moderní infračervená mikroskopie (FTIR) kombinuje infračervenou spektroskopii a klasickou mikroskopii. FTIR vykazuje vysokou specificitu vůči molekulární struktuře a chemickému složení, proto je FTIR mikroskopie obzvláště užitečná pro analýzu prostorové distribuce jednotlivých chemických individualit ve Vašem vzorku pomocí chemického mapování či imagingu.
FTIR mikroskopie obvykle pracuje se spektry v tzv. střední infračervené oblasti, pokrývajícími rozsah vlnočtů obvykle 4 000 – 400 cm⁻¹ (resp. vlnové délky přibližně 2 500 – 25 000 nm). Absorpce ve této střední IR oblasti odpovídají základním (fundamentálním) vibracím chemických vazeb mezi atomy molekul. Charakteristické frekvence jednotlivých vibračních pásů umožňují snadné přiřazení pásů a jejich interpretaci, avšak měření v klasické střední infračervené oblasti často vyžaduje přípravu vzorku (tvorba KBr tablet, řezání atd.).
Absorpce v blízké infračervené oblasti (NIR) ovšem vznikají z overtonů a kombinačních pásů základních vibrací ze střední oblasti, a to obvykle v rozsahu vlnočtů 12 500 až 4 000 cm⁻¹ (vlnové délky 800 až 2 500 nm). Overtony a kombinační pásy v NIR mají ve své podstatě nižší molární absorpční koeficienty, což vede k větší hloubce průniku záření do vzorku. Proto lze NIR spektra snáze získat s minimální přípravou vzorku. Navíc NIR záření dokáže procházet mnoha materiály, jako je sklo nebo čirý plast, což umožňuje sběr spekter přímo v obalech, například ve farmaceutických blistrech.
Moderní FTIR mikroskopy (jako Nicolet RaptIR X) mají extenzivní možnosti výměny detektorů, zdrojů záření a dalších komponent a umožňují tak komplexní získávání spekter vzorků ve střední a blízké infračervené oblasti, např. 12 500 – 400 cm-1, a to samozřejmě i formou rychlého chemického mapování.
Včelí křídlo připevněno mezi klasickými laboratorními sklíčky – automatickým odečtením spektra krycího materiálu získáme okamžitě NIR spektrum odpovídající distribuci chitinu (NIR spektroskopie nemá problém s měřením přes sklo!).
Použitá literatura + odkazy:
Thermo Fischer scientific technical note: TN54667_E 07/26M
Thermo Fischer brochure: Nicolet RaptIR X